原位末端凋亡检测实验
一、实验目的
TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,准确反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。
二、实验原理
细胞在发生凋亡时会激活DNA内切酶,这些内切酶可以使染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3’-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下经脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化氢酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’末端,从而可通过显微镜实现对凋亡细胞的检测,,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)正常细胞或正在增殖的细胞中几乎不发生DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。
三、实验应用
细胞凋亡研究、肿瘤药效。
四、交付标准
图片、检测报告。
五、结果展示
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