阿尔茨海默病（AD）如同隐匿在认知深处的迷雾，长久以来，种属差异、模型局限与人脑病理的难以复刻，成为探索路上难以逾越的屏障。人诱导多能干细胞（iPSC细胞库）源自成体细胞重编程，无伦理限制，iPSC分化的皮质神经元，能够高度模拟人脑皮质生理特征与疾病病理，为AD研究提供了接近生理的人源体外模型。

基于专业的iPSC技术服务平台，赛业生物构建了iPSC分化的皮质神经元（iPSC-CN（皮质神经元），服务编号SY-iCN-00001），主要适用于神经系统疾病的基础研究、药物筛选以及细胞治疗领域的相关研究。常用于探索AD等神经系统疾病的发病机制，筛选治疗神经系统关联疾病的潜在药物，探究细胞治疗在神经系统疾病治疗中的应用等。该细胞已经过全面质量检测，可直接用于实验研究，现货速发、还可灵活定制，加速您的AD研究之旅。

iPSC定向分化为皮质神经元

细胞基本信息

制备流程

图1. iPSC来源皮质神经元制备流程图

本产品为D3天的前体细胞，复苏后继续分化培养至D14即可。

• iPSC培养：iPSC使用专用培养基进行培养，置于37℃、5% CO₂的恒温培养箱中，定期更换培养基，保持细胞处于良好的生长状态。
• 神经诱导分化：当iPSC生长至一定密度时，更换为神经诱导培养基，进行神经诱导分化。在诱导过程中，通过调整培养基成分和培养条件，引导iPSC向神经外胚层方向分化。
• 细胞消化：利用酶解法（Accutase 酶）将细胞从培养皿中分离出来。
• 皮质神经元前体细胞培养：将收获的神经前体细胞接种到含有皮质神经元完全培养基的培养皿中进行分化培养，待细胞生长至合适时间收获实验验证。

免疫荧光检测皮质神经元特异性标志物（NeuN、MAP2）

图2. iPSC来源皮质神经元特异性标志物的免疫荧光染色

免疫荧光染色显示iPSC分化的皮质神经元（第14天）表达神经元特异性标志物NeuN（红色）和MAP2（绿色），细胞核由DAPI复染（蓝色）。合并图显示NeuN与MAP2共定位，确认神经元身份及成熟状态。

成熟皮质神经元膜片钳电生理检测

图3. iPSC来源皮质神经元膜片钳电生理检测

（图A）iPSC来源皮质神经元的电压门控钠/钾电流记录全细胞膜片钳记录显示，在去极化步阶刺激下，神经元产生典型的快速内向钠电流（向下 deflection）和缓慢外向钾电流（向上 deflection），表明功能性电压门控离子通道的表达。（图B）iPSC来源皮质神经元诱发的动作电位在电流钳模式下，向神经元注入去极化电流脉冲可诱发单次或多次动作电位，显示神经元具备兴奋性和动作电位发放能力。（图C） iPSC来源皮质神经元自发的动作电位在无外加刺激条件下，记录到神经元自发性动作电位发放，提示神经元具备自主电活动能力，进一步证实其功能成熟度。

TFR和CD98流式检测

图4. iPSC来源皮质神经元表达血脑屏障靶向相关分子TFR和CD98

流式细胞术检测iPSC分化的皮质神经元中与血脑屏障（BBB）靶向递送相关的表面标志物表达。结果显示，绝大多数活细胞（Zombie阴性）共表达TFR（转铁蛋白受体）和CD98（LAT1/CD98hc）。

TFR是经典的血脑屏障受体介导转cytosis（RMT）靶点，CD98则与氨基酸转运及BBB内皮细胞功能调控相关。该结果提示iPSC来源神经元不仅具备神经元功能特性，同时可能保留或共表达与BBB靶向递送相关的分子特征，为其作为体外BBB模型或中枢神经系统靶向药物筛选模型提供了依据。

赛业生物iPSC-皮质神经元优势

• 分化效率≥90%，稳定高效
• 成熟度高，具备电生理活性
• 批次差异极小，均一性优异
• 严格质控，报告全面
• 可提供皮质神经元成熟配套培养基及定制细胞服务

分化神经细胞流式验证指南

血脑屏障（BBB）功能异常是AD的重要病理特征，其结构与功能受神经血管单元协同调控，神经元是其中关键效应细胞。因此AD病症除了BBB功能异常，往往还伴随着突触和神经元网络功能障碍，神经元细胞死亡，炎症等，而AD的发生与神经元死亡这层因果关系背后的分子机制目前尚未可知。

iPSC皮质神经元可高度模拟人源神经元生理病理特征，其表面及胞内大量表达BBB相关转运体、受体与调控靶点。流式细胞术的定量与iPSC-皮质神经元表面靶点的联合，为解析AD中神经元–血脑屏障互作机制、药物跨脑屏障效应评价提供可靠的疾病模型，具有重要研究价值。

针对这一关键环节和流式实验痛点，赛业生物特别编制了《iPSC-皮层神经元BBB相关靶点流式验证指南》，一册梳理流式检测的通用实验原理、SOP和关键技术要点、常见问题解决方案及结果分析思路。该手册可以用于皮质神经元，也可以用于其他神经元细胞的流式检测指导。

赛业生物iPSC技术平台赋能科研与转化

除了iPSC-皮质神经元，赛业生物iPSC细胞库还可提供包括：可进一步分化为神经、视网膜及造血系统细胞的多种iPSC衍生细胞，以及通过基因编辑技术引入SOD1、TARDBP等基因点突变构建的神经退行性疾病细胞模型等。此外，赛业生物的iPSC一站式体外技术服务平台，拥有成熟的重编程、基因编辑和体外分化技术，同时结合一站式表型分析服务，可为客户提供从疾病模型构建到检测的全流程解决方案，助力多种疾病应用场景的高效研究与开发。

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