OriCell®原代细胞是冻存第几代的？

以下是几类主要细胞类型的冻存代次

• 神经元细胞、骨髓巨噬细胞：原代冻存。
• 星形胶质细胞、内皮细胞：第2代冻存。
• ICR小鼠胚胎成纤维细胞：未灭活与灭活两类均是第1代冻存。
• 间充质干细胞：除C57BL/6、Balb/C小鼠来源骨髓间充质干细胞是第6代冻存，人源/大鼠/兔/狗来源的间充质干细胞（含骨髓/脂肪/脐带/牙髓/羊膜/脐血）均为第2代冻存。
• 间充质干细胞带GFP/RFP荧光标记：除C57BL/6、Balb/C小鼠骨髓间充质干细胞带GFP/RFP是第6代，C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞/GFP是第2代，其他来源的间充质干细胞带荧光均为第5代。
• 胚胎干细胞：第20代左右冻存。
• 神经干细胞：第2代冻存。
• 肾小管上皮细胞、软骨细胞：第1代冻存。

以上所列某些细胞代次偶尔会有变动，购买之前请详询我们。

间充质干细胞为什么提供P2，不是P0？小鼠BMSC是P6，收到需要马上实验吗？

看到上面各类细胞的冻存代次您可能会疑惑——“为什么大部分间充质干细胞提供第2代？小鼠骨髓间充质干细胞是第6代次，是有什么特别注意事项吗？”

以SD大鼠骨髓间充质干细胞举例，刚从乳鼠股骨内提取出来原代细胞，除了间充质干细胞之外，还有很多“杂细胞”，比如单核细胞，红细胞和巨噬细胞。在体外培养过程中，使用大鼠骨髓间充质干细胞完全培养基，低比例的“杂质细胞”可被间充质干细胞专用培养体系筛选去除。传到P2，骨髓间充质干细胞所占比例就能达到95%甚至更高。如果贴壁的“杂质细胞”数量偏多形成小细胞团，还可以使用细胞刮去除。小鼠骨髓间充质干细胞则需要多次传代才能进一步纯化，所以现货代次是P6。

另外，客户收到间充质干细胞后，建议培养稳定后，传代使用。赛业生物OriCell®提供的各类间充质干细胞其干性维持优秀，无支原体污染、表达干细胞表面标记，可诱导向成骨、成脂、成软骨分化，各项严格质检可以保证客户收到细胞后，再传5代都能满足实验需求，但我们始终建议尽可能使用较低代次细胞进行科研工作。

如何避免MSC细胞老化问题，细胞到后期会变“胖”？

间充质干细胞本身没有无限增殖能力，传代次数有限，随着代数增长，细胞老化是必然的现象。

但以下有几个因素会加快MSC老化。

• 1.传代时机太晚，如果细胞密度过高（90%以上）再传代，MSC容易进入平台衰退期，俗称“长太过了”。不仅是MSC，其他细胞系，如果传代时机太晚，也容易导致细胞老化。
• 2.胰酶消化时间过长，MSC的贴壁能力较弱，使用0.25%胰酶进行消化1分钟，显微镜下观察细胞间隙变大、变圆，用手轻拍培养器皿可见细胞脱落即可终止消化。如果消化时间偏长，3分钟甚至5分钟，都容易导致MSC的老化，失去极性呈现完全塌下去的形态。
• 3.初始接种细胞密度过低，也容易导致细胞老化。