肝癌，这个沉默的杀手，已成为全球严峻的健康威胁。它不仅是第六大常见癌症，更是全球癌症相关死亡的第三大主因。

人肝癌细胞系（HuH-7细胞系）是一种常用的人肝癌细胞模型，广泛应用于病毒性肝炎（如HCV、HBV）、肝癌发生机制、药物筛选、肿瘤免疫及抗癌药物开发等研究领域。下面小赛为大家介绍这株细胞的背景、培养要点和应用案例。

认识HuH-7细胞系

细胞名称：人肝癌细胞系

英文简称：HuH-7

别称：HUH-7、HuH7、Huh7、HUH7.0、JTC-39、Japanese Tissue Culture-39等

OriCell®细胞货号：H1-1901

OriCell®HuH-7 细胞系完全培养基货号：CMH1-1901（500mL），DMH1-1901（200mL，即用型）

细胞特性：贴壁生长；上皮细胞样

培养条件：95%空气；5% CO2；37℃

培养基：DMEM+10% FBS

倍增时间：48~72h

图1. HuH-7细胞正常形态（分别为40X、100X）

HuH-7细胞呈典型的上皮样细胞形态，边界清晰，核仁明显，无空泡化或颗粒物，背景干净，透明度高，折光性好。

图2. HuH-7细胞生长异常形态（100X）

相对正常细胞形态来说，异常细胞形态不规则，失去典型的‘铺路石’状单层排列，细胞核肿胀、核膜不清晰，胞质内出现大量、密集的空泡，细胞透明度下降，折光性变差，视野中有大量细胞碎片、凋亡小体漂浮。

图3. HuH-7细胞带GFP荧光、RFP荧光

HuH-7细胞系收货与培养要点

01 HuH-7细胞系收货后该怎么做？

1. 常温运输瓶：75%酒精喷瓶→超净台→去封口膜再擦瓶口。镜下检查是否大片细胞脱落/污染（如正常，至下一步骤）。静置37℃、5% CO2≥2h，让运输震落的细胞重新贴壁。留2份1mL培养基4℃存样，弃多余培养基，补10mL新鲜完全培养基继续培养。每3天换液，汇合度95%时传代。

2. 冻存管：收到的冻存细胞如24h内复苏：-80℃暂存；>24h：直接液氮保存。复苏前10min转-80℃让液氮挥发。37℃水浴快速融化（剩2mm冰晶即停）→250×g，离心4min→重悬接种T25（≥5mL完全培养基）2h内勿动，让细胞贴壁；次日换液或传代。每3天换液，汇合度95%时传代。

02 传代培养HuH-7细胞系，需要注意哪些要点？

1. 预处理：培养基、PBS、0.25%胰酶均预热37℃。

2. 消化：PBS洗2次→加1.5mL（T25）/3mL（T75）胰酶→镜下70-80%细胞变圆即拍壁脱落。立即加2倍体积完全培养基终止，轻吹打收集。

3. 接种密度：计数法：(2–3)×10⁴活细胞/cm²。比例法：1:4–1:6，96h内可达95%汇合。摇匀后37℃、5% CO2培养。

4. 日常培养：传代次日观察，漂浮多即换液。每3天换完全培养基，汇合度95%再次传代或冻存。

特别提醒：全程37℃预热试剂，动作轻、气泡少。HuH-7贴壁不紧，消化时间宁短勿长，拍壁代替猛吹。若出现聚团，可100×g低速离心2min弃团块后再接。任何异常（大量漂浮、浑浊、空泡）先留样再及时联系细胞供应商。

HuH-7细胞系科研应用

01 HuH KO细胞助力肝细胞癌信号调控机制研究

Signal Transduction and Targeted Therapy（IF=40.8）一篇研究首次证明了SOX9是驱动YAP核转位的关键调节因子，并提出了通过靶向SOX9-YAP相互作用来治疗YAP驱动癌症的潜在策略。

研究人员委托赛业生物构建了SOX9基因敲除（SOX9KO）的HuH-7细胞和HEK-293细胞，并利用过表达SOX9和YAP的慢病毒载体来评估蛋白功能。他们利用免疫共沉淀、体外pull-down分析、邻位连接分析（PLA）和微量热涌动（MST）分析等来探究蛋白之间的相互作用[1]。

图4. SOX9通过与YAP直接相互作用来促进YAP的核转位[1]

02 应用于人源肿瘤细胞系异种移植（CDX）模型

赛业生物已成功建立了HuH-7细胞系的肿瘤移植模型，基于C-NKG、NOD-Scid小鼠作为受体，并通过皮下进行接种。HuH-7细胞系可单独出售，也可提供对应的肿瘤移植模型构建及药效评价服务。

赛业生物验证数据

图5. 肝癌细胞HuH-7皮下移植肿瘤及体重生长曲线（n=6）

将细胞以皮下注射的形式接种到7周的C-NKG和NOD-Scid小鼠体内，并在不同的时间点测量成瘤体积。细胞接种量为5×10⁶/只，数据以Mean±SEM形式呈现。结果显示HuH-7在C-NKG和NOD-Scid小鼠上容易建模。肿瘤体积预计在接种后11天达到100-500mm³，在接种后28天达到3000mm³实验终点，给药窗口期预计在17天左右。

赛业生物Huh-7相关体外模型推荐

1. HuH-7细胞现货及配套试剂

赛业生物OriCell®为科研人员提供稳定且质量可靠的HuH-7细胞供应及支持，细胞通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测及STR鉴定，还可提供细胞所需的各类培养试剂。

OriCell®相关产品推荐

细胞规格：1×10⁶。此外，还可提供Hep G2、SK-HEP-1、SMMC-7721、SNU-182、SNU-398等众多经典肝癌细胞系。

2. HuH-7细胞基因编辑

HuH-7细胞常用于实验室中与肝癌相关的基因表达及功能研究。依托成熟稳定的细胞技术服务平台，赛业生物可提供HuH-7细胞系的基因修饰包括基因敲除、点突变、基因敲入、过表达和干扰等，以及细胞常规功能及特性检测等服务。

KO细胞模型推荐（部分列举）

细胞规格：1×10⁶；还可定制KO细胞服务，“金标准”保证蛋白敲除！