骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

小鼠骨骼肌细胞分离提取与培养 

拆解肌肉迷宫

1.处死小鼠，75%的酒精浸泡2-3min。

2.在超净工作台中用眼科镊取出小鼠，将其置于解剖盘内，使其腹部向上。

3.用眼科剪在腹部的中间位置横切。

4.用眼科镊夹住腹部皮肤向头尾两个方向扯，充分暴露小鼠的后腿部。

5.换一套干净的眼科镊和眼科剪将小鼠后腿完整取下，将取下的小鼠后腿放到一个装有含2%双抗PBS的皿中。

6.在皿中将后腿上的肌肉组织剔出，修剪掉肌肉上黏连的脂肪和筋膜后将肌肉转移至空皿内。

7.用眼科剪将肌肉组织充分剪碎(大概剪4min)，将胰酶和一型胶原酶1:1混合，在组织中加入两倍体积的混合酶重悬，重悬的悬液转移到15mL离心管中。

8.将离心管放到37℃水浴中消化30min（每隔10min取出用移液枪吹打摇匀），消化完成后加入等体积的完全培养基混匀。

9.混匀好的细胞悬液过70μm的细胞筛网，并用PBS充分冲洗1-2次，将滤液收集至新的离心管中。

10.500×g，离心4min，去上清。

11.用2-3mL完全培养基重悬细胞悬液，根据细胞量接种至相应培养皿中。

12.将细胞置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养。

13.48h观察细胞，是否有较多细胞碎片和死细胞，可以酌情考虑半量换液或全换液。

1. 通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测。

2. 通过细胞复苏活力检测，复苏存活率>80%。

3. 通过细胞周期检测，倍增周期<72h。

4. 通过免疫荧光检测，表达α-SMA（≥90%）。