在一般培养条件下，群体中的细胞处于不同的细胞周期时相之中。为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡，故常需借助某种自然或人工的实验手段，使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相的现象，这就是细胞同步化技术。

由于细胞群体受到多种条件限制，对结果有很大影响，所以一般采用人工同步方法，下面就来介绍几种常用的方法。

该法利用M期细胞变圆易脱落的特点，将生长旺盛的贴壁细胞按一定的时间间隔振荡，使M期细胞脱落，逐步收集培养基，并补充新的培养基。按照此法继续收集，可得到一定数量的M期细胞。

优点：方法简单，同步化程度高且不受药物伤害，能够真实反应细胞周期状况；

缺点：由于M期较短，得到的细胞很少，并且只适用于贴壁细胞。

秋水仙素可以抑制微管聚合，因而能有效地抑制细胞纺锤体的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期。此方法也比较简单，将细胞培养至指数生长期，加入秋水仙素，使培养基最终浓度为0.25~0.5μg/mL，作用6~7min，收集细胞800r/min离心5~10min，弃上清，沉于管底的细胞即为M期细胞。

注意：由于秋水仙素对细胞有一定毒性，用量较小或作用时间较短时细胞活性尚可恢复，而用量过大或时间过长则细胞不能存活，因此使用时应严格控制其剂量和作用时间。

胸腺嘧啶核苷（TdR）是一种DNA合成可逆抑制剂（阻断S期，去除后S期可继续进行）。为了加强细胞同步化效果，常采用两次TdR阻断法，即双阻断法。

第1次阻断时间比S期长但短于G2、M、G1三期总和，让它们越过S期，但又不使按周期发展最快的细胞进入下一个S期。第2次阻断时间同第1次，再释放。

下面以HeLa细胞为例加以说明（HeLa细胞周期时间为21h，其中G1期为10h，S期为7h，G2期为3h，M期为1h）。

注意：具体TdR作用和释放的时间应参考每一种待同步化细胞的细胞周期各时相测定的参考值，也可根据经验确定。

根据细胞周期测定的数值，采用TdR双阻断法使细胞同步在G1/S期交界处后，洗去TdR使细胞释放后继续培养。其培养时间应大于S期时间而小于S+G2期时间。然后先用振荡法使已进入M期的细胞脱落，弃去上清培养基；再用胰酶消化，加入新鲜培养基制成细胞悬液，离心收集细胞，即为G2期细胞。

方法1：将用M期阻断法获得的细胞加入一定量的培养基，继续培养1~10h即可获得各阶段的G1期细胞。

方法2：用缺乏异亮氨酸的培养基培养细胞，培养时间超过一个细胞周期，即可获得中G1期细胞。

采用血清饥饿法：