Cyagen Oricell

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        • OriCell®Caco-2人结直肠腺癌细胞系
        • OriCell®T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
        • OriCell®HCT 116人结肠癌细胞系
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        • OriCell®LoVo 人结肠癌细胞系
        • OriCell®LS 174T人结肠腺癌细胞系
        • OriCell®HCT-8人回盲肠癌细胞系
        • OriCell®KYSE-150人食管鳞癌细胞系
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        • OriCell®Hep G2人肝癌细胞系
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        • OriCell®HuH-7人肝癌细胞系
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        • OriCell®HCT-15人结肠癌细胞系
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        • OriCell®Hce-8693人盲肠腺癌细胞系
        • OriCell®CW-2人结肠癌细胞系
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        • OriCell®Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞系
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        • OriCell®AML-12小鼠正常肝细胞系
        • OriCell®H-4-II-E大鼠肝细胞系
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        • OriCell®INS-1 大鼠胰岛素瘤细胞系
        • OriCell®IPEC-J2猪小肠上皮细胞系
      • ● 循环(心血管)系统
        • OriCell®NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者自然杀伤细胞系
        • OriCell®U266B1人外周淋巴细胞系
        • OriCell®HL-60人原髓细胞白血病细胞系
        • OriCell®K-562人慢性髓系白血病细胞系
        • OriCell®CCRF-CEM人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞系
        • OriCell®Reh人急性非B非T淋巴细胞白血病系
        • OriCell®HuT78人T淋巴细胞白血病细胞系
        • OriCell®Jurkat,Clone E6-1人白血病T淋巴细胞系
        • OriCell®THP-1人单核细胞白血病细胞系
        • OriCell®Nalm-6成人B型急性淋巴细胞白血病细胞系
        • OriCell®H9人T淋巴细胞系
        • OriCell®RAW264.7小鼠单核细胞白血病细胞系
        • OriCell®Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞系
        • OriCell®MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14细胞系
        • OriCell®H9c2(2-1) 大鼠心肌细胞系
      • ● 呼吸系统
        • OriCell®BEAS-2B 人正常肺上皮细胞系
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        • OriCell®NCI-H661人大细胞肺癌细胞系
        • OriCell®NCI-H23人非小细胞肺癌细胞系
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        • OriCell®NCI-H524人非小细胞肺癌细胞系
        • OriCell®NCI-H226人肺鳞癌细胞系
        • OriCell®LL/2(LLC1、LLC) 小鼠Lewis肺癌细胞系
        • OriCell®KLN 205小鼠肺鳞癌细胞系
        • OriCell®LA795小鼠肺腺癌细胞系
        • OriCell®V79仓鼠肺细胞系
      • ● 生殖系统
        • OriCell®CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株系
        • OriCell®C-33 A人宫颈癌细胞系
        • OriCell®Hela人宫颈癌细胞系
        • OriCell®LNCaP Clone FGC 人前列腺癌细胞系
        • OriCell®PC-3 人前列腺癌细胞系
        • OriCell®SK-OV-3人卵巢癌细胞系
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        • OriCell®Ishikawa人子宫内膜癌细胞系
        • OriCell®RL95-2人子宫内膜癌细胞系
        • OriCell®MS751人子宫颈表皮癌细胞系
        • OriCell®KGN人卵巢颗粒细胞系
        • OriCell®15P-1小鼠睾丸上皮细胞系
        • OriCell®TM3小鼠睾丸间质细胞系
        • OriCell®TM4小鼠睾丸支持细胞系
        • OriCell®RM-1小鼠前列腺癌细胞系
        • OriCell®LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞系
      • ● 泌尿系统
        • OriCell®HK-2人肾近曲小管细胞系
        • OriCell®ACHN人肾腺癌细胞系
        • OriCell®HEK 293人胚肾细胞系
        • OriCell®293-L.P人胚肾细胞系
        • OriCell®786-0人肾细胞腺癌细胞系
        • OriCell®Caki-1人肾透明细胞癌细胞系
        • OriCell®SW-13人肾上腺皮质小细胞癌细胞系
        • OriCell®5637人膀胱癌细胞系
        • OriCell®TCCSUP人膀胱癌细胞系
        • OriCell®T24 人膀胱移行细胞癌细胞系
        • OriCell®HEK-293T(293T)人胚肾细胞系
        • OriCell®HEK 293A人胚肾细胞系
        • OriCell®Renca小鼠肾癌细胞系
        • OriCell®MBT2小鼠膀胱移形癌细胞系
        • OriCell®NRK大鼠肾细胞系
        • OriCell®PC-12大鼠肾上腺啫铬细胞瘤细胞系
        • OriCell®NRK-52E大鼠肾小管上皮细胞
      • ● 神经系统
        • OriCell®SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®LN229人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U251人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞系
        • OriCell®ARPE-19人视网膜色素上皮细胞系
        • OriCell®BeWo人绒毛膜肿瘤细胞系
        • OriCell®T98G人脑胶质瘤细胞系
        • OriCell®Neuro-2a小鼠神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®HT-22 小鼠海马神经元细胞系
        • OriCell®GL261 小鼠神经胶质瘤细胞系
        • OriCell®HEI-OC1小鼠耳蜗毛细胞系
        • OriCell®BEND.3小鼠脑微血管内皮细胞系
        • OriCell®C6大鼠胶质瘤细胞系
      • ● 内分泌系统
        • OriCell®BHK-21仓鼠肾成纤维细胞系
        • OriCell®HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞系
        • OriCell®ZR-75-1人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MCF-7人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MDA-MB-231人乳腺癌细胞系
        • OriCell®T-47D人乳腺管癌细胞系
        • OriCell®SK-BR-3人乳腺腺癌细胞系
        • OriCell®PANC-1人胰腺癌细胞系
        • OriCell®HPAF-II人胰腺癌细胞系
        • OriCell®BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®AsPC-1人转移胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®FTC-133人滤泡状甲状腺癌细胞系
        • OriCell®CAL-62人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®BHT101人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®KMH-2人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®8305C人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®B-CPAP人甲状腺乳头状癌细胞系
        • OriCell®SW579人甲状腺鳞癌细胞系
        • OriCell®TT人甲状腺导管癌细胞系
        • OriCell®AtT-20小鼠垂体瘤细胞系
        • OriCell®4T1小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®Beta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞系
        • OriCell®Pan02小鼠胰腺癌细胞系
        • OriCell®EMT-6小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®LLC-MK2恒河猴肾细胞系
        • OriCell®Vero 非洲绿猴肾细胞系
        • OriCell®COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞系
        • OriCell®PK-15猪肾细胞系
      • ● 免疫系统
        • OriCell®U-937人组织细胞淋巴瘤细胞系
        • OriCell®RAJI人Burkitt's淋巴瘤细胞系
        • OriCell®HMy2.CIR人B淋巴母细胞系
        • OriCell®A375 人恶性黑色素瘤细胞系
        • OriCell®A-431人皮肤鳞癌细胞系
        • OriCell®SK-MEL-28 人皮肤恶性黑色瘤细胞系
        • OriCell®SU-DHL-2人弥漫性组织淋巴瘤细胞系
        • OriCell®A875 人黑色素瘤细胞系
        • OriCell®HaCaT人永生化表皮细胞系
        • OriCell®3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞)系
        • OriCell®3T3-swiss albino小鼠胚胎成纤维系
        • OriCell®NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞系
        • OriCell®EL4小鼠淋巴瘤细胞系
        • OriCell®B16小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®YUMM1.7 小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®B16-F10 小鼠皮肤黑色素瘤细胞系
        • OriCell®P388D1小鼠淋巴样瘤细胞系
        • OriCell®E.G7-OVA小鼠T淋巴瘤细胞系
        • OriCell®Ana-1小鼠巨噬细胞系
        • OriCell®C1498小鼠白血病细胞系
        • OriCell®P815小鼠肥大细胞瘤细胞系
        • OriCell®B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞系
      • ● 运动(肌肉)系统
        • OriCell®HT-1080人纤维肉瘤系
        • OriCell®MG-63人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®U-2 OS人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
        • OriCell®Saos-2人成骨肉瘤细胞系
        • OriCell®SW1353人软骨肉瘤细胞系
        • OriCell®A-673人横纹肌肉瘤细胞系
        • OriCell®C2C12小鼠成肌细胞系
        • OriCell®L6大鼠成肌细胞系
    • 荧光细胞系
      • ● 标记的细胞系
        • OriCell®A549 with GFP
        • OriCell®A549 with RFP
        • OriCell®A549 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HCT 116 with GFP
        • OriCell®HCT 116 with RFP
        • OriCell®HCT 116 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HT-29 with GFP
        • OriCell®HT-29 with RFP
        • OriCell®HT-29 with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hep G2 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with GFP
        • OriCell®MGC-803 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with Luciferase & GFP
        • OriCell®KYSE520 with GFP
        • OriCell®KYSE520 with RFP
        • OriCell®KYSE520 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MCF-7 with GFP
        • OriCell®MCF-7 with RFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with GFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with GFP
        • OriCell®BXPC-3 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with Luciferase & GFP
        • OriCell®TCCSUP with GFP
        • OriCell®TCCSUP with RFP
        • OriCell®TCCSUP with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hela with GFP
        • OriCell®Hela with RFP
        • OriCell®Hela with Luciferase & GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with RFP
        • OriCell®U251 with GFP
        • OriCell®U251 with RFP
        • OriCell®U251 with Luciferase & GFP
        • OriCell®U-87 MG with GFP
        • OriCell®U-87 MG with RFP
        • OriCell®U-87 MG with Luciferase & GFP
        • OriCell®CT26.WT with GFP
        • OriCell®CT26.WT with RFP
        • OriCell®CT26.WT with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with RFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with Luciferase & GFP
        • OriCell®4T1 with GFP
        • OriCell®4T1 with RFP
        • OriCell®Pan02 with GFP
        • OriCell®Pan02 with RFP
        • OriCell®Pan02 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MBT2 with GFP
        • OriCell®MBT2 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with GFP
        • OriCell®EMT-6 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with Luciferase & GFP
  • 细胞培养试剂
    • 进口牛血清
      • ● OriCell®特级胎牛血清
      • ● OriCell®优级胎牛血清
      • ● OriCell®标准级胎牛血清
      • ● OriCell®去外泌体血清
      • ● OriCell®新生牛血清
      • ● OriCell®成年牛血清
    • 细胞培养基
      • ● 干细胞完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞完全培养基
        • 胚胎干细胞完全培养基
        • 神经干细胞完全培养基
        • 脐带脐血肌腱干细胞完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞完全培养基
        • 内皮细胞完全培养基
        • 神经元完全培养基
        • 星形胶质细胞完全培养基
        • 成纤维细胞完全培养基
      • ● 干细胞诱导分化试剂盒
        • 成骨诱导分化试剂盒
        • 成脂诱导分化试剂盒
        • 成软骨诱导分化试剂盒
        • 拟胚体(EB)形成试剂盒
        • 成神经元诱导分化试剂盒
        • 成星形胶质细胞诱导分化试剂盒
        • 成肝细胞诱导分化试剂盒
      • ● 干细胞无血清培养基
        • OriCell®成人骨髓间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®成人脂肪间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐带间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐血间充质干细胞完全培养基(无血清II型)
        • OriCell®人牙髓间充质干细胞完全培养基(无血清 II 型)
      • ● 干细胞去外泌体完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脐带脐血间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
      • ● 细胞系完全培养基
        • 消化系统相关培养基
        • 循环(心血管)系统相关培养基
        • 呼吸系统相关培养基
        • 生殖系统相关培养基
        • 泌尿系统相关培养基
        • 神经系统相关培养基
        • 免疫系统相关培养基
        • 内分泌系统相关培养基
    • 细胞培养辅助产品
      • ● 细胞冻存液
        • OriCell®通用无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®通用血清型非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白程序冻存液
      • ● 细胞因子
        • 白介素
        • 生长因子
        • 肿瘤坏死因子
        • 集落刺激因子
        • 干扰素
        • 趋化因子
        • 其它因子
      • ● 干细胞检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(人)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(大鼠)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(小鼠)表面标记检测试剂盒
      • ● 生长添加物
        • OriCell®NEAA细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®ITS细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®L-Glutamine (100×)谷氨酰胺添加物
      • ● 染色液
        • OriCell®油红O染色液 (Oil Red O Solultion)
        • OriCell®茜素红染色液 (Alizarin Red S Solution)
        • OriCell®阿利辛蓝染色液 (Alcian Blue 8GX Solultion)
      • ● 抗生素
        • OriCell®青霉素-链霉素溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-两性霉素B溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-庆大霉素溶液(100X)
        • OriCell®支原体清除试剂(100X)
      • ● 缓冲液
        • OriCell®PBS缓冲液(1X)
        • OriCell®Hank's Balanced Salt Solution(HBSS)
      • ● 蛋白酶
        • OriCell®胰蛋白酶细胞消化液(0.25%)
        • OriCell®无动物蛋白胰酶替代物
        • OriCell®Collagenase Type I (0.1%) 一型胶原蛋白酶
      • ● 辅剂
        • OriCell®明胶溶液(0.1%)
        • OriCell®Poly-L-lysine 多聚-L-赖氨酸
  • 细胞技术服务
    • 干细胞提取与鉴定服务
    • 干细胞定向诱导分化服务
    • 胎牛血清筛选服务
  • 市场活动
    • 促销活动
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浙大团队开发出新型聚合物胶束,有望治疗椎间盘退变

新型聚合物胶束,有望治疗椎间盘退变 | 赛业生物OriCell

 

椎间盘退变(IVDD)是引起人们腰痛的主要原因,这可能会产生高昂的医疗费用。外源性人脂肪间充质干细胞(human ADSCs)移植已被证明对椎间盘退变有良好的治疗效果。然而,退变区域内活性氧水平(ROS)的升高会抑制human ADSCs增殖,并促进细胞凋亡。因此,需要找到方法来降低微环境中的ROS水平,从而提高human ADSCs的活力。

 

因此,浙江大学医学院附属第二医院的研究人员设计出一种基于夹竹桃麻素(apocynin,APO)的新型两亲性聚合物胶束,其中胶束核心包载小分子化合物kartogenin(KGN),用于治疗椎间盘退变。研究人员发现,这种聚合物胶束能够准确并可控地递送APO和KGN,这两种分子可以保护human ADSCs免受氧化应激,并促进细胞分化成髓核样表型,从而具有治疗椎间盘退变的潜力。这项研究成果于近日发表在《Bioactive Materials》杂志上。

Bioactive Materials

 

PAKM的设计和合成

为了开发基于聚合物胶束的药物递送系统,研究人员首先通过酯酶响应性的酚酯键将APO药物连接到聚合物链上,并在胶束的核心包载KGN,形成单一复合物PAKM。APO作为NADPH氧化酶抑制剂,可刺激human ADSCs的增殖,而细胞在KGN的作用下可进一步发育成髓核样表型。

 

PAKM是一种可注射的聚合物胶束,能够实现APO和KGN的可控释放。研究人员随后通过实验证实了PAKM的酯酶响应性。在酯酶存在时,APO逐步从PAKM中释放。human ADSCs在氧化应激下酯酶活性增加,有利于酯酶反应性APO的释放。(本实验中的human ADSCs及培养基由赛业OriCell®提供。)

图1. 合成PAKM的示意图 | 赛业生物

图1. 合成PAKM的示意图

 

PAKM的生物活性

接下来,研究人员评估了De-PAKM(利用酯酶获得的PAKM降解产物)对细胞活力的影响。human ADSCs经H2O2处理后,细胞活力水平为54.1%,而De-PAKM+H2O2组为89.6%,比APO+H2O2组及KGN+H2O2组处理更高,表明De-PAKM是在氧化应激下提高细胞活力的有效工具。同时,De-PAKM处理还能降低H2O2诱导的细胞凋亡,保护human ADSCs免受氧化应激(图2)。

图2. PAKM降低炎症刺激后的细胞凋亡并维持细胞活力 | 赛业生物OriCell

图2. PAKM降低炎症刺激后的细胞凋亡并维持细胞活力

 

当椎间盘发生退变时,纤维环和髓核的含水量逐渐下降,椎间高度降低,髓核细胞(NP)减少,且细胞外基质(ECM)降解。于是,他们又分析了human ADSCs中分解代谢基因(MMP-13)以及炎症相关基因(COX-2)的表达。MMP-13是ECM代谢中的主要分解代谢因子,H2O2刺激增加了MMP-13和COX-2表达,但De-PAKM处理最大程度降低了这种增幅,也就是说,De-PAKM可以显著抑制H2O2诱导的炎症发生。

 

之后,他们还利用DCFH-DA探针评估了H2O2诱导的细胞内ROS产生。免疫荧光分析结果显示,H2O2通常会诱导human ADSCs细胞内ROS的增加。不过,与APO和KGN单独处理相比,De-PAKM处理可更多地诱导抗氧化酶SOD的表达,表明De-PAKM可增强human ADSCs抵抗氧化应激的能力。

 

此外,PAKM还具有很强的抑制ECM降解和诱导human ADSCs分化成髓核的能力。与对照、H2O2和H2O2+APO组相比,PAKM组表现出最高的SOX9表达水平,这种转录因子的表达与维持健康的ECM之间存在正相关。KRT19通常作为鉴定髓核细胞的阳性标志物。与KGN或APO处理组相比,用PAKM培养的human ADSCs显示出更高的KRT19水平。

图3. 抑制H2O2诱导的氧化应激反应及human ADSCs ECM释放 | 赛业生物OriCell

图3. 抑制H2O2诱导的氧化应激反应及human ADSCs ECM释放

 

自噬在维持干细胞稳态方面起着至关重要的作用,并且可帮助细胞抵抗椎间盘退变中的过度氧化应激。通过自噬标志物LC3 II的免疫荧光分析,研究人员发现De-PAKM能更有效地激活human ADSCs中的自噬,从而抑制了H2O2诱导的氧化应激反应。

 

PAKM的体内治疗效果

最后,研究人员还通过X射线分析评估了椎间盘高度,以评估PAKM的体内治疗效果;并通过磁共振成像(MRI)评估了椎间盘含水量。他们发现,将PAKM与human ADSCs一起注射到大鼠体内能够提高椎间盘高度和含水量,表现出良好的治疗潜力(图4)。

图4. 通过X射线分析评估椎间盘高度 | 赛业生物

图4. 通过X射线分析评估椎间盘高度

 

结语

综上,研究人员开发出一种可注射的酯酶响应性胶束PAKM,将APO和KGN共同递送到椎间盘中。分析结果证明了PAKM的生物安全性,以及它能够刺激human ADSCs的分化,并通过抑制氧化应激来保护细胞。他们认为,PAKM与human ADSCs的结合使用可以在体内减轻椎间盘退变,为生物疗法的开发提供了一种新策略。

 

原文检索:

Chao Yu,Dongdong Li,Chenggui Wang,Kaishun Xia,Jingkai Wang,Xiaopeng Zhou, et al. Injectable kartogenin and apocynin loaded micelle enhances the alleviation of intervertebral disc degeneration by adipose-derived stem cell. Bioact Mater. 2021 6(10):3568-3579.

doi:10.1016/j.bioactmat.2021.03.018.

 

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