Cyagen Oricell

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        • OriCell®Caco-2人结直肠腺癌细胞系
        • OriCell®T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
        • OriCell®HCT 116人结肠癌细胞系
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        • OriCell®LS 174T人结肠腺癌细胞系
        • OriCell®HCT-8人回盲肠癌细胞系
        • OriCell®KYSE-150人食管鳞癌细胞系
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        • OriCell®Hep G2人肝癌细胞系
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        • OriCell®HuH-7人肝癌细胞系
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        • OriCell®HCT-15人结肠癌细胞系
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        • OriCell®CW-2人结肠癌细胞系
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        • OriCell®Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞系
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        • OriCell®AML-12小鼠正常肝细胞系
        • OriCell®H-4-II-E大鼠肝细胞系
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        • OriCell®INS-1 大鼠胰岛素瘤细胞系
        • OriCell®IPEC-J2猪小肠上皮细胞系
      • ● 循环(心血管)系统
        • OriCell®NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者自然杀伤细胞系
        • OriCell®U266B1人外周淋巴细胞系
        • OriCell®HL-60人原髓细胞白血病细胞系
        • OriCell®K-562人慢性髓系白血病细胞系
        • OriCell®CCRF-CEM人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞系
        • OriCell®Reh人急性非B非T淋巴细胞白血病系
        • OriCell®HuT78人T淋巴细胞白血病细胞系
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        • OriCell®THP-1人单核细胞白血病细胞系
        • OriCell®Nalm-6成人B型急性淋巴细胞白血病细胞系
        • OriCell®H9人T淋巴细胞系
        • OriCell®RAW264.7小鼠单核细胞白血病细胞系
        • OriCell®Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞系
        • OriCell®MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14细胞系
        • OriCell®H9c2(2-1) 大鼠心肌细胞系
      • ● 呼吸系统
        • OriCell®BEAS-2B 人正常肺上皮细胞系
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        • OriCell®NCI-H2126人肺癌细胞系
        • OriCell®NCI-H661人大细胞肺癌细胞系
        • OriCell®NCI-H23人非小细胞肺癌细胞系
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        • OriCell®NCI-H226人肺鳞癌细胞系
        • OriCell®LL/2(LLC1、LLC) 小鼠Lewis肺癌细胞系
        • OriCell®KLN 205小鼠肺鳞癌细胞系
        • OriCell®LA795小鼠肺腺癌细胞系
        • OriCell®V79仓鼠肺细胞系
      • ● 生殖系统
        • OriCell®CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株系
        • OriCell®C-33 A人宫颈癌细胞系
        • OriCell®Hela人宫颈癌细胞系
        • OriCell®LNCaP Clone FGC 人前列腺癌细胞系
        • OriCell®PC-3 人前列腺癌细胞系
        • OriCell®SK-OV-3人卵巢癌细胞系
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        • OriCell®Ishikawa人子宫内膜癌细胞系
        • OriCell®RL95-2人子宫内膜癌细胞系
        • OriCell®MS751人子宫颈表皮癌细胞系
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        • OriCell®15P-1小鼠睾丸上皮细胞系
        • OriCell®TM3小鼠睾丸间质细胞系
        • OriCell®TM4小鼠睾丸支持细胞系
        • OriCell®RM-1小鼠前列腺癌细胞系
        • OriCell®LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞系
      • ● 泌尿系统
        • OriCell®HK-2人肾近曲小管细胞系
        • OriCell®ACHN人肾腺癌细胞系
        • OriCell®HEK 293人胚肾细胞系
        • OriCell®293-L.P人胚肾细胞系
        • OriCell®786-0人肾细胞腺癌细胞系
        • OriCell®Caki-1人肾透明细胞癌细胞系
        • OriCell®SW-13人肾上腺皮质小细胞癌细胞系
        • OriCell®5637人膀胱癌细胞系
        • OriCell®TCCSUP人膀胱癌细胞系
        • OriCell®T24 人膀胱移行细胞癌细胞系
        • OriCell®HEK-293T(293T)人胚肾细胞系
        • OriCell®HEK 293A人胚肾细胞系
        • OriCell®Renca小鼠肾癌细胞系
        • OriCell®MBT2小鼠膀胱移形癌细胞系
        • OriCell®NRK大鼠肾细胞系
        • OriCell®PC-12大鼠肾上腺啫铬细胞瘤细胞系
        • OriCell®NRK-52E大鼠肾小管上皮细胞
      • ● 神经系统
        • OriCell®SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®LN229人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U251人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞系
        • OriCell®ARPE-19人视网膜色素上皮细胞系
        • OriCell®BeWo人绒毛膜肿瘤细胞系
        • OriCell®T98G人脑胶质瘤细胞系
        • OriCell®Neuro-2a小鼠神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®HT-22 小鼠海马神经元细胞系
        • OriCell®GL261 小鼠神经胶质瘤细胞系
        • OriCell®HEI-OC1小鼠耳蜗毛细胞系
        • OriCell®BEND.3小鼠脑微血管内皮细胞系
        • OriCell®C6大鼠胶质瘤细胞系
      • ● 内分泌系统
        • OriCell®BHK-21仓鼠肾成纤维细胞系
        • OriCell®HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞系
        • OriCell®ZR-75-1人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MCF-7人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MDA-MB-231人乳腺癌细胞系
        • OriCell®T-47D人乳腺管癌细胞系
        • OriCell®SK-BR-3人乳腺腺癌细胞系
        • OriCell®PANC-1人胰腺癌细胞系
        • OriCell®HPAF-II人胰腺癌细胞系
        • OriCell®BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®AsPC-1人转移胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®FTC-133人滤泡状甲状腺癌细胞系
        • OriCell®CAL-62人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®BHT101人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®KMH-2人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®8305C人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®B-CPAP人甲状腺乳头状癌细胞系
        • OriCell®SW579人甲状腺鳞癌细胞系
        • OriCell®TT人甲状腺导管癌细胞系
        • OriCell®AtT-20小鼠垂体瘤细胞系
        • OriCell®4T1小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®Beta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞系
        • OriCell®Pan02小鼠胰腺癌细胞系
        • OriCell®EMT-6小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®LLC-MK2恒河猴肾细胞系
        • OriCell®Vero 非洲绿猴肾细胞系
        • OriCell®COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞系
        • OriCell®PK-15猪肾细胞系
      • ● 免疫系统
        • OriCell®U-937人组织细胞淋巴瘤细胞系
        • OriCell®RAJI人Burkitt's淋巴瘤细胞系
        • OriCell®HMy2.CIR人B淋巴母细胞系
        • OriCell®A375 人恶性黑色素瘤细胞系
        • OriCell®A-431人皮肤鳞癌细胞系
        • OriCell®SK-MEL-28 人皮肤恶性黑色瘤细胞系
        • OriCell®SU-DHL-2人弥漫性组织淋巴瘤细胞系
        • OriCell®A875 人黑色素瘤细胞系
        • OriCell®HaCaT人永生化表皮细胞系
        • OriCell®3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞)系
        • OriCell®3T3-swiss albino小鼠胚胎成纤维系
        • OriCell®NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞系
        • OriCell®EL4小鼠淋巴瘤细胞系
        • OriCell®B16小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®YUMM1.7 小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®B16-F10 小鼠皮肤黑色素瘤细胞系
        • OriCell®P388D1小鼠淋巴样瘤细胞系
        • OriCell®E.G7-OVA小鼠T淋巴瘤细胞系
        • OriCell®Ana-1小鼠巨噬细胞系
        • OriCell®C1498小鼠白血病细胞系
        • OriCell®P815小鼠肥大细胞瘤细胞系
        • OriCell®B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞系
      • ● 运动(肌肉)系统
        • OriCell®HT-1080人纤维肉瘤系
        • OriCell®MG-63人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®U-2 OS人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
        • OriCell®Saos-2人成骨肉瘤细胞系
        • OriCell®SW1353人软骨肉瘤细胞系
        • OriCell®A-673人横纹肌肉瘤细胞系
        • OriCell®C2C12小鼠成肌细胞系
        • OriCell®L6大鼠成肌细胞系
    • 荧光细胞系
      • ● 标记的细胞系
        • OriCell®A549 with GFP
        • OriCell®A549 with RFP
        • OriCell®A549 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HCT 116 with GFP
        • OriCell®HCT 116 with RFP
        • OriCell®HCT 116 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HT-29 with GFP
        • OriCell®HT-29 with RFP
        • OriCell®HT-29 with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hep G2 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with GFP
        • OriCell®MGC-803 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with Luciferase & GFP
        • OriCell®KYSE520 with GFP
        • OriCell®KYSE520 with RFP
        • OriCell®KYSE520 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MCF-7 with GFP
        • OriCell®MCF-7 with RFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with GFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with GFP
        • OriCell®BXPC-3 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with Luciferase & GFP
        • OriCell®TCCSUP with GFP
        • OriCell®TCCSUP with RFP
        • OriCell®TCCSUP with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hela with GFP
        • OriCell®Hela with RFP
        • OriCell®Hela with Luciferase & GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with RFP
        • OriCell®U251 with GFP
        • OriCell®U251 with RFP
        • OriCell®U251 with Luciferase & GFP
        • OriCell®U-87 MG with GFP
        • OriCell®U-87 MG with RFP
        • OriCell®U-87 MG with Luciferase & GFP
        • OriCell®CT26.WT with GFP
        • OriCell®CT26.WT with RFP
        • OriCell®CT26.WT with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with RFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with Luciferase & GFP
        • OriCell®4T1 with GFP
        • OriCell®4T1 with RFP
        • OriCell®Pan02 with GFP
        • OriCell®Pan02 with RFP
        • OriCell®Pan02 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MBT2 with GFP
        • OriCell®MBT2 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with GFP
        • OriCell®EMT-6 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with Luciferase & GFP
  • 细胞培养试剂
    • 进口牛血清
      • ● OriCell®特级胎牛血清
      • ● OriCell®优级胎牛血清
      • ● OriCell®标准级胎牛血清
      • ● OriCell®去外泌体血清
      • ● OriCell®新生牛血清
      • ● OriCell®成年牛血清
    • 细胞培养基
      • ● 干细胞完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞完全培养基
        • 胚胎干细胞完全培养基
        • 神经干细胞完全培养基
        • 脐带脐血肌腱干细胞完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞完全培养基
        • 内皮细胞完全培养基
        • 神经元完全培养基
        • 星形胶质细胞完全培养基
        • 成纤维细胞完全培养基
      • ● 干细胞诱导分化试剂盒
        • 成骨诱导分化试剂盒
        • 成脂诱导分化试剂盒
        • 成软骨诱导分化试剂盒
        • 拟胚体(EB)形成试剂盒
        • 成神经元诱导分化试剂盒
        • 成星形胶质细胞诱导分化试剂盒
        • 成肝细胞诱导分化试剂盒
      • ● 干细胞无血清培养基
        • OriCell®成人骨髓间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®成人脂肪间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐带间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐血间充质干细胞完全培养基(无血清II型)
        • OriCell®人牙髓间充质干细胞完全培养基(无血清 II 型)
      • ● 干细胞去外泌体完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脐带脐血间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
      • ● 细胞系完全培养基
        • 消化系统相关培养基
        • 循环(心血管)系统相关培养基
        • 呼吸系统相关培养基
        • 生殖系统相关培养基
        • 泌尿系统相关培养基
        • 神经系统相关培养基
        • 免疫系统相关培养基
        • 内分泌系统相关培养基
    • 细胞培养辅助产品
      • ● 细胞冻存液
        • OriCell®通用无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®通用血清型非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白程序冻存液
      • ● 细胞因子
        • 白介素
        • 生长因子
        • 肿瘤坏死因子
        • 集落刺激因子
        • 干扰素
        • 趋化因子
        • 其它因子
      • ● 干细胞检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(人)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(大鼠)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(小鼠)表面标记检测试剂盒
      • ● 生长添加物
        • OriCell®NEAA细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®ITS细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®L-Glutamine (100×)谷氨酰胺添加物
      • ● 染色液
        • OriCell®油红O染色液 (Oil Red O Solultion)
        • OriCell®茜素红染色液 (Alizarin Red S Solution)
        • OriCell®阿利辛蓝染色液 (Alcian Blue 8GX Solultion)
      • ● 抗生素
        • OriCell®青霉素-链霉素溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-两性霉素B溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-庆大霉素溶液(100X)
        • OriCell®支原体清除试剂(100X)
      • ● 缓冲液
        • OriCell®PBS缓冲液(1X)
        • OriCell®Hank's Balanced Salt Solution(HBSS)
      • ● 蛋白酶
        • OriCell®胰蛋白酶细胞消化液(0.25%)
        • OriCell®无动物蛋白胰酶替代物
        • OriCell®Collagenase Type I (0.1%) 一型胶原蛋白酶
      • ● 辅剂
        • OriCell®明胶溶液(0.1%)
        • OriCell®Poly-L-lysine 多聚-L-赖氨酸
  • 细胞技术服务
    • 干细胞提取与鉴定服务
    • 干细胞定向诱导分化服务
    • 胎牛血清筛选服务
  • 市场活动
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海军军医大学团队在利用外泌体治疗骨质疏松上取得新进展

骨质疏松是老年人中常见的慢性疾病。据统计,目前全球超过2亿人罹患骨质疏松症,每3秒就有一例骨质疏松性骨折发生。我国50岁以上人群的骨质疏松症发病率为19.2%。为此,科学家们在寻找方案来逆转骨质流失。

 

近日,海军军医大学的苏佳灿/陈晓研究团队在《Bioactive Materials》杂志上发表研究成果。他们提出了一种通过在外泌体膜表面展示CXCR4来获得使其骨靶向骨外泌体的新方法,有望逆转与年龄相关的骨质流失。

Bioactive Materials

 

研究背景

骨髓间充质干细胞(BMSC)是骨髓脂肪细胞和成骨细胞的祖细胞。BMSC从成骨分化转变为成脂分化,骨形成受损,是许多病理性骨质流失的特征。抑制成脂分化并促进成骨分化,有望治疗骨质疏松症。

 

之前的研究发现,随着年龄的增长,miR-188显著增加。这种miRNA可调节BMSC的分化命运,促进脂肪生成并抑制骨生成。因此,以miR-188为靶点进行治疗可以促进骨形成。然而,大剂量siRNA的全身给药可能对非骨骼组织产生不利影响。这就突出了骨靶向递送系统的必要性。

 

外泌体(exosomes)在药物递送方面展示出惊人的潜力。同时,考虑到SDF-1/CXCR4轴在造血干细胞归巢中发挥重要作用,研究人员假设CXCR4阳性的外泌体可以被招募到骨髓。于是,他们尝试用CXCR4+外泌体来实现miRNA拮抗剂的骨靶向递送,以此来逆转与年龄相关的骨质流失。

 

CXCR4+外泌体的体内分布

为了验证这一假设,研究人员通过慢病毒包装系统将CXCR4基因引入NIH-3T3细胞系,并通过RT-qPCR和免疫荧光证明了CXCR4在NIH-3T3细胞上成功表达。之后,他们从培养上清液中分离出外泌体,并证实CXCR4在外泌体的表面表达。

 

接下来,为了验证CXCR4+外泌体具有骨靶向特性,他们开展了体内追踪实验。他们用Cy5荧光染料对NIH-3T3细胞和CXCR4+ NIH-3T3细胞的外泌体进行标记,并通过尾静脉注射到小鼠体内。他们发现,CXCR4+ EXO组小鼠的股骨处存在特异性的染料富集,表明CXCR4+外泌体特异性靶向骨髓(图1)。据悉,这是第一项通过外泌体膜表面展示CXCR4来使其靶向骨的研究,这为在骨髓中富集外泌体提供了指导。

图1. CXCR4+外泌体的体内分布

图1. CXCR4+外泌体的体内分布

 

杂合纳米颗粒的骨靶向特性

之后,研究人员将CXCR4+外泌体与携带antagomir-188(miR-188拮抗剂,Cy5标记)的脂质体融合,形成杂合纳米颗粒(hybrid NP),并注射到小鼠体内。正如追踪研究所示,外泌体/脂质体比例为1:1和4:1的杂合纳米颗粒可聚集在骨髓中。此外,小鼠股骨中的荧光强度逐渐增加,这表明荧光标记的货物被捕获在骨髓中(图2)。注射48小时后,小鼠的肝肾功能保持稳定,证明纳米颗粒在体内没有细胞毒性。这些结果表明,具有骨靶向特性的CXCR4+杂合纳米颗粒被成功构建。

图2. CXCR4+杂合纳米颗粒的体内分布

图2. CXCR4+杂合纳米颗粒的体内分布

 

杂合纳米颗粒促进成骨分化

并抑制成脂分化

为了进一步研究携带antagomir-188的杂合纳米颗粒的功效,研究人员在年龄相关性骨质疏松症小鼠模型上测试了它的效果。他们每周一次向18月龄的老年雄性小鼠静脉内注射杂合纳米颗粒,总共持续8周。与对照相比,经antagomir-188 NP处理的小鼠明显显示出明显更高的骨量保留。

 

接下来,他们通过苏木精/伊红(H&E)染色以及脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的免疫组化来探索骨生成和脂肪生成。他们发现,携带antagomir-188的杂合纳米颗粒降低了骨小梁周围的骨髓脂肪细胞的数量,并增加了骨衬细胞的数量(图3)。

图3. 杂合纳米颗粒逆转了与年龄相关的骨质流失

图3. 杂合纳米颗粒逆转了与年龄相关的骨质流失

 

在体外研究中,他们也发现携带antagomir-188的杂合纳米颗粒可以增加ALP阳性的成骨细胞合成。油红O染色也证明,在成脂诱导后,antagomir-188 NP抑制了BMSC中的脂质滴形成。在此,研究人员使用了赛业生物的成骨诱导分化培养基和成脂诱导分化培养基。这些结果表明,递送antagomir-188的骨靶向纳米治疗剂通过促进BMSC的成骨分化和抑制成脂分化而逆转与年龄相关的骨质流失。

 

结论

这项研究在外泌体的表面展示了CXCR4,并将其与携带antagomir-188的脂质体融合

这项研究在外泌体的表面展示了CXCR4,并将其与携带antagomir-188的脂质体融合。CXCR4+外泌体-脂质体杂合纳米颗粒倾向于在骨髓中聚集并释放antagomir-188,后者可促进成骨分化并抑制成脂分化,从而逆转与年龄相关的骨质流失。它提供了一种基于外泌体的骨靶向RNAi递送策略,有望作为病理性骨质流失的疗法。

 

原文检索:

Exosome-guided bone targeted delivery of Antagomir-188 as an anabolic therapy for bone loss.

DOI:10.1016/j.bioactmat.2021.02.014.

 

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