Cyagen Oricell

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      • ● 循环(心血管)系统
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        • OriCell®CCRF-CEM人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞系
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        • OriCell®HuT78人T淋巴细胞白血病细胞系
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        • OriCell®THP-1人单核细胞白血病细胞系
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        • OriCell®H9人T淋巴细胞系
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        • OriCell®Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞系
        • OriCell®MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14细胞系
        • OriCell®H9c2(2-1) 大鼠心肌细胞系
      • ● 呼吸系统
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        • OriCell®NCI-H23人非小细胞肺癌细胞系
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        • OriCell®NCI-H226人肺鳞癌细胞系
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      • ● 生殖系统
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        • OriCell®Hela人宫颈癌细胞系
        • OriCell®LNCaP Clone FGC 人前列腺癌细胞系
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        • OriCell®LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞系
      • ● 泌尿系统
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        • OriCell®ACHN人肾腺癌细胞系
        • OriCell®HEK 293人胚肾细胞系
        • OriCell®293-L.P人胚肾细胞系
        • OriCell®786-0人肾细胞腺癌细胞系
        • OriCell®Caki-1人肾透明细胞癌细胞系
        • OriCell®SW-13人肾上腺皮质小细胞癌细胞系
        • OriCell®5637人膀胱癌细胞系
        • OriCell®TCCSUP人膀胱癌细胞系
        • OriCell®T24 人膀胱移行细胞癌细胞系
        • OriCell®HEK-293T(293T)人胚肾细胞系
        • OriCell®HEK 293A人胚肾细胞系
        • OriCell®Renca小鼠肾癌细胞系
        • OriCell®MBT2小鼠膀胱移形癌细胞系
        • OriCell®NRK大鼠肾细胞系
        • OriCell®PC-12大鼠肾上腺啫铬细胞瘤细胞系
        • OriCell®NRK-52E大鼠肾小管上皮细胞
      • ● 神经系统
        • OriCell®SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®LN229人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U251人胶质瘤细胞系
        • OriCell®U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞系
        • OriCell®ARPE-19人视网膜色素上皮细胞系
        • OriCell®BeWo人绒毛膜肿瘤细胞系
        • OriCell®T98G人脑胶质瘤细胞系
        • OriCell®Neuro-2a小鼠神经母细胞瘤细胞系
        • OriCell®HT-22 小鼠海马神经元细胞系
        • OriCell®GL261 小鼠神经胶质瘤细胞系
        • OriCell®HEI-OC1小鼠耳蜗毛细胞系
        • OriCell®BEND.3小鼠脑微血管内皮细胞系
        • OriCell®C6大鼠胶质瘤细胞系
      • ● 内分泌系统
        • OriCell®BHK-21仓鼠肾成纤维细胞系
        • OriCell®HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞系
        • OriCell®ZR-75-1人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MCF-7人乳腺癌细胞系
        • OriCell®MDA-MB-231人乳腺癌细胞系
        • OriCell®T-47D人乳腺管癌细胞系
        • OriCell®SK-BR-3人乳腺腺癌细胞系
        • OriCell®PANC-1人胰腺癌细胞系
        • OriCell®HPAF-II人胰腺癌细胞系
        • OriCell®BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®AsPC-1人转移胰腺腺癌细胞系
        • OriCell®FTC-133人滤泡状甲状腺癌细胞系
        • OriCell®CAL-62人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®BHT101人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®KMH-2人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®8305C人甲状腺癌细胞系
        • OriCell®B-CPAP人甲状腺乳头状癌细胞系
        • OriCell®SW579人甲状腺鳞癌细胞系
        • OriCell®TT人甲状腺导管癌细胞系
        • OriCell®AtT-20小鼠垂体瘤细胞系
        • OriCell®4T1小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®Beta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞系
        • OriCell®Pan02小鼠胰腺癌细胞系
        • OriCell®EMT-6小鼠乳腺癌细胞系
        • OriCell®LLC-MK2恒河猴肾细胞系
        • OriCell®Vero 非洲绿猴肾细胞系
        • OriCell®COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞系
        • OriCell®PK-15猪肾细胞系
      • ● 免疫系统
        • OriCell®U-937人组织细胞淋巴瘤细胞系
        • OriCell®RAJI人Burkitt's淋巴瘤细胞系
        • OriCell®HMy2.CIR人B淋巴母细胞系
        • OriCell®A375 人恶性黑色素瘤细胞系
        • OriCell®A-431人皮肤鳞癌细胞系
        • OriCell®SK-MEL-28 人皮肤恶性黑色瘤细胞系
        • OriCell®SU-DHL-2人弥漫性组织淋巴瘤细胞系
        • OriCell®A875 人黑色素瘤细胞系
        • OriCell®HaCaT人永生化表皮细胞系
        • OriCell®3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞)系
        • OriCell®3T3-swiss albino小鼠胚胎成纤维系
        • OriCell®NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞系
        • OriCell®EL4小鼠淋巴瘤细胞系
        • OriCell®B16小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®YUMM1.7 小鼠黑色素瘤细胞系
        • OriCell®B16-F10 小鼠皮肤黑色素瘤细胞系
        • OriCell®P388D1小鼠淋巴样瘤细胞系
        • OriCell®E.G7-OVA小鼠T淋巴瘤细胞系
        • OriCell®Ana-1小鼠巨噬细胞系
        • OriCell®C1498小鼠白血病细胞系
        • OriCell®P815小鼠肥大细胞瘤细胞系
        • OriCell®B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞系
      • ● 运动(肌肉)系统
        • OriCell®HT-1080人纤维肉瘤系
        • OriCell®MG-63人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®U-2 OS人骨肉瘤细胞系
        • OriCell®RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
        • OriCell®Saos-2人成骨肉瘤细胞系
        • OriCell®SW1353人软骨肉瘤细胞系
        • OriCell®A-673人横纹肌肉瘤细胞系
        • OriCell®C2C12小鼠成肌细胞系
        • OriCell®L6大鼠成肌细胞系
    • 荧光细胞系
      • ● 标记的细胞系
        • OriCell®A549 with GFP
        • OriCell®A549 with RFP
        • OriCell®A549 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HCT 116 with GFP
        • OriCell®HCT 116 with RFP
        • OriCell®HCT 116 with Luciferase & GFP
        • OriCell®HT-29 with GFP
        • OriCell®HT-29 with RFP
        • OriCell®HT-29 with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hep G2 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with GFP
        • OriCell®MGC-803 with RFP
        • OriCell®MGC-803 with Luciferase & GFP
        • OriCell®KYSE520 with GFP
        • OriCell®KYSE520 with RFP
        • OriCell®KYSE520 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MCF-7 with GFP
        • OriCell®MCF-7 with RFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with GFP
        • OriCell®MDA-MB-231 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with GFP
        • OriCell®BXPC-3 with RFP
        • OriCell®BXPC-3 with Luciferase & GFP
        • OriCell®TCCSUP with GFP
        • OriCell®TCCSUP with RFP
        • OriCell®TCCSUP with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hela with GFP
        • OriCell®Hela with RFP
        • OriCell®Hela with Luciferase & GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with GFP
        • OriCell®SK-OV-3 with RFP
        • OriCell®U251 with GFP
        • OriCell®U251 with RFP
        • OriCell®U251 with Luciferase & GFP
        • OriCell®U-87 MG with GFP
        • OriCell®U-87 MG with RFP
        • OriCell®U-87 MG with Luciferase & GFP
        • OriCell®CT26.WT with GFP
        • OriCell®CT26.WT with RFP
        • OriCell®CT26.WT with Luciferase & GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with GFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with RFP
        • OriCell®Hepa 1-6 with Luciferase & GFP
        • OriCell®4T1 with GFP
        • OriCell®4T1 with RFP
        • OriCell®Pan02 with GFP
        • OriCell®Pan02 with RFP
        • OriCell®Pan02 with Luciferase & GFP
        • OriCell®MBT2 with GFP
        • OriCell®MBT2 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with GFP
        • OriCell®EMT-6 with RFP
        • OriCell®EMT-6 with Luciferase & GFP
  • 细胞培养试剂
    • 进口牛血清
      • ● OriCell®特级胎牛血清
      • ● OriCell®优级胎牛血清
      • ● OriCell®标准级胎牛血清
      • ● OriCell®去外泌体血清
      • ● OriCell®新生牛血清
      • ● OriCell®成年牛血清
    • 细胞培养基
      • ● 干细胞完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞完全培养基
        • 胚胎干细胞完全培养基
        • 神经干细胞完全培养基
        • 脐带脐血肌腱干细胞完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞完全培养基
        • 内皮细胞完全培养基
        • 神经元完全培养基
        • 星形胶质细胞完全培养基
        • 成纤维细胞完全培养基
      • ● 干细胞诱导分化试剂盒
        • 成骨诱导分化试剂盒
        • 成脂诱导分化试剂盒
        • 成软骨诱导分化试剂盒
        • 拟胚体(EB)形成试剂盒
        • 成神经元诱导分化试剂盒
        • 成星形胶质细胞诱导分化试剂盒
        • 成肝细胞诱导分化试剂盒
      • ● 干细胞无血清培养基
        • OriCell®成人骨髓间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®成人脂肪间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐带间充质干细胞完全培养基(无血清Ⅱ型)
        • OriCell®人脐血间充质干细胞完全培养基(无血清II型)
        • OriCell®人牙髓间充质干细胞完全培养基(无血清 II 型)
      • ● 干细胞去外泌体完全培养基
        • 骨髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脂肪间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 脐带脐血间充质干细胞去外泌体完全培养基
        • 牙髓间充质干细胞去外泌体完全培养基
      • ● 细胞系完全培养基
        • 消化系统相关培养基
        • 循环(心血管)系统相关培养基
        • 呼吸系统相关培养基
        • 生殖系统相关培养基
        • 泌尿系统相关培养基
        • 神经系统相关培养基
        • 免疫系统相关培养基
        • 内分泌系统相关培养基
    • 细胞培养辅助产品
      • ● 细胞冻存液
        • OriCell®通用无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®通用血清型非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白非程序冻存液
        • OriCell®神经干细胞无蛋白程序冻存液
      • ● 细胞因子
        • 白介素
        • 生长因子
        • 肿瘤坏死因子
        • 集落刺激因子
        • 干扰素
        • 趋化因子
        • 其它因子
      • ● 干细胞检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(人)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(大鼠)表面标记检测试剂盒
        • OriCell®间充质干细胞(小鼠)表面标记检测试剂盒
      • ● 生长添加物
        • OriCell®NEAA细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®ITS细胞培养添加物(100×)
        • OriCell®L-Glutamine (100×)谷氨酰胺添加物
      • ● 染色液
        • OriCell®油红O染色液 (Oil Red O Solultion)
        • OriCell®茜素红染色液 (Alizarin Red S Solution)
        • OriCell®阿利辛蓝染色液 (Alcian Blue 8GX Solultion)
      • ● 抗生素
        • OriCell®青霉素-链霉素溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-两性霉素B溶液(100X)
        • OriCell®青霉素-链霉素-庆大霉素溶液(100X)
        • OriCell®支原体清除试剂(100X)
      • ● 缓冲液
        • OriCell®PBS缓冲液(1X)
        • OriCell®Hank's Balanced Salt Solution(HBSS)
      • ● 蛋白酶
        • OriCell®胰蛋白酶细胞消化液(0.25%)
        • OriCell®无动物蛋白胰酶替代物
        • OriCell®Collagenase Type I (0.1%) 一型胶原蛋白酶
      • ● 辅剂
        • OriCell®明胶溶液(0.1%)
        • OriCell®Poly-L-lysine 多聚-L-赖氨酸
  • 细胞技术服务
    • 干细胞提取与鉴定服务
    • 干细胞定向诱导分化服务
    • 胎牛血清筛选服务
  • 市场活动
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复旦大学团队Biomaterials发文,另辟蹊径治疗肩袖损伤

复旦大学附属华山医院运动医学科陈世益教授领导的研究团队近日在生物材料领域顶尖期刊《Biomaterials》(IF = 10.317)上发表文章,证明了一种间充质干细胞的条件培养基在促进腱-骨愈合上具有积极作用。

Biomaterials

 

肩袖撕裂是一种常见的运动损伤,威胁着专业运动员及广大运动爱好者的健康。医生大多采用肩袖修复术将撕裂的肌腱重新固定在骨表面。大多数患者能够获得良好的效果,但有些患者会发生再次撕裂。出现这种现象的原因是止点(enthesis)无法快速再生腱-骨界面的结构。止点是肌腱或韧带附着于骨头的部位。

 

基于再生医学的干细胞治疗有望为肩袖损伤提供新的治疗手段。人们已采用不同来源的间充质干细胞(MSC)来促进腱-骨愈合,并在实验中获得了成功。然而,引入外源性材料也存在风险。植入的干细胞可能具有致瘤性,这限制了临床应用。近期的研究发现,真正有效的是干细胞的分泌组(secretome),而间充质干细胞的条件培养基包含了干细胞分泌的所有营养因子。

 

基于此,研究人员收集了人类骨髓来源干细胞的条件培养基(hBMSC-CM),并检测了这种无细胞方法是否能够在大鼠肩袖修复模型中促进腱-骨愈合。为了确保培养基在腱-骨界面处局部释放,他们将小块的海绵浸泡在培养基中,然后植入肩袖修复处。之后,他们利用相关细胞系在体外验证了观察到的结果,并在体内进一步研究了hBMSC-CM介导的腱-骨愈合作用(图1)。

图1. 研究技术路线图

图1. 研究技术路线图

 

hBMSC-CM促进了大鼠肩袖处的腱-骨愈合

研究人员首先利用赛业的间充质干细胞分化培养基,对间充质细胞进行了鉴定。他们接着收集了间充质干细胞的条件培养基,测定了几种生长因子的浓度。他们发现,培养基中含有TGF-β、VEGF和IGF-1等能够促进腱-骨愈合的生长因子。

 

之后,他们将海绵切成1mg的小块,在灭菌后放入hBMSC-CM中浸泡30分钟,并植入大鼠的肩袖修复处。术后4周和8周,他们通过组织学和放射学方法观察到了再生的止点(图2)。Micro-CT显示,CM组修复区域的骨密度显著高于DMEM对照组。

 

由于成纤维细胞是腱-骨止点重建的主要参与者,他们还检测了腱-骨界面处的α-SMA连续表达。根据免疫组化染色分析,两组患者主要在术后2周表达α-SMA。定量分析结果表明,CM组的阳性面积显著高于DMEM组,表明CM组的重建过程更为活跃。这些结果显示,hBMSC-CM可提高再生止点的质量,促进腱-骨愈合。

图2. 肩袖修复后再生止点的组织学和放射学分析

图2. 肩袖修复后再生止点的组织学和放射学分析

 

hBMSC-CM的积极作用与巨噬细胞有关

体内实验表明,海绵的完全降解期约为2周,与炎症期重叠。在炎症发生期间,巨噬细胞浸润在腱-骨界面。于是,研究人员分析了hBMSC-CM是否在体内和体外影响巨噬细胞的表型。免疫组化结果显示,术后2周,CM组的CD86(M1表型标志物)水平显著低于DMEM组,而CD163(M2表型标志物)水平显著高于DMEM组,表明hBMSC-CM能够抑制M1表型并促进M2表型(图3)。

 

与表型变化一致,促炎细胞因子(TNF-α、IL-1α和 IL-1β)和抗炎细胞因子(TGF-β、IL-10和IL-13)的浓度也发生了变化。在LPS刺激后,促炎细胞因子的mRNA和蛋白质水平显著升高,而抗炎细胞因子的mRNA水平没有显著变化。不过,hBMSC-CM的干预下调了促炎细胞因子的水平,而增强了抗炎细胞因子的表达。

图3. hBMSC-CM对巨噬细胞表型的影响

图3. hBMSC-CM对巨噬细胞表型的影响

 

那么,hBMSC-CM对体内腱-骨愈合的积极作用是否取决于巨噬细胞的存在?为了解答这个问题,研究人员使用了巨噬细胞清除(MC)大鼠,并观察了hBMSC-CM对MC大鼠肩袖腱-骨愈合的影响。通过组织学和生物力学分析,他们发现巨噬细胞清除可促进大鼠肩袖的腱-骨愈合,但在没有巨噬细胞的情况下,hBMSC-CM失去了其优势,表明hBMSC-CM对腱-骨愈合的积极作用依赖于巨噬细胞。

 

hBMSC-CM通过Smad2/3通路

调控巨噬细胞的极化

最后,研究人员探索了hBMSC-CM调控巨噬细胞极化的机制。在LPS刺激后,hBMSC-CM能够显著升高Smad2/3的磷酸化水平,而抑制剂SB431542有效抑制了Smad2/3磷酸化。同时,SB431542显著逆转了hBMSC-CM对巨噬细胞极化的影响。当Smad2/3激活被SB431542阻断后,hBMSC-CM对促炎细胞因子的抑制作用和对抗炎细胞因子的促进作用也被消除。这一现象表明,在炎性环境下,Smad2/3信号通路参与了hBMSC-CM对巨噬细胞极化的调控。

 

基于这些结果,研究人员认为hBMSC-CM通过促进巨噬细胞向M2表型极化并抑制M1表型,促进了大鼠模型肩袖处的腱-骨愈合。在hBMSC-CM的刺激下,成纤维细胞在腱-骨界面处积累,伴随着纤维软骨(fibrocartilage)的更早形成以及数量更多。再生的止点不仅更加有序,而且具有更好的生物力学性能(图4)。考虑到无细胞hBMSC-CM的安全性,研究人员认为它有望应用于临床来促进腱-骨愈合。

图4. 大鼠肩袖修复后的腱-骨愈合示意图

图4. 大鼠肩袖修复后的腱-骨愈合示意图

 

原文检索:

Chen W, Sun Y, Gu X, Cai J, Liu X, Zhang X, Chen J, Hao Y, Chen S. Conditioned medium of human bone marrow-derived stem cells promotes tendon-bone healing of the rotator cuff in a rat model. Biomaterials. 2021 Feb 11;271:120714. doi: 10.1016/j.biomaterials.2021.120714. Epub ahead of print. PMID: 33610048.

 

OriCell®为各种干细胞定制了专门的完全培养基和诱导分化培养基,其中完全培养基可最大程度维持间充质干细胞的增殖能力并保持分化潜能,而诱导分化培养基则可用于间充质干细胞成骨、成脂、成肝和成软骨的定向分化。每款培养基均经过OriCell®细胞团队十余年以来的筛选和验证,为老师们养好自己的间充质干细胞提供有力保障。

 

关于OriCell®

OriCell®是赛业生物旗下致力于干细胞试剂及干细胞技术服务的子品牌,作为拥有15年历史的科研干细胞供应商,自主开发了百余种干细胞产品。OriCell®的原代细胞、胎牛血清、细胞培养基及细胞冻存液已服务数万客户,获得了市场占有率和满意度的双赢,产品已直接应用于包括CNS(Cell, Nature, Science)三大期刊在内的5200余篇学术论文。如有需要,欢迎联系我们咨询。

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