RAW264.7是小鼠来源的单核巨噬细胞系，广泛用于免疫学、炎症反应、肿瘤微环境及药物筛选研究。因其易于培养、转染效率高，成为实验室的“明星细胞”之一！它脾气不算难搞，但稍不留神就给你整一出‘炸毛’——今天贴壁贴得比502还牢，明天就突然化身“悬浮小气泡”；转染刚想秀操作，它却当场表演“集体躺平”。

别慌！今天咱们就把RAW264.7的正确打开方式再整理成一份“细胞分化防坑指南”，直接上干货！

细胞简介

产品名称：小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

英文简称：RAW264.7

别称：RAW264、RAW2647、RAW264.7、RAW-264.7、Raw 264.7、Raw264.7

培养体系：DMEM+10%FBS，37°C，5% CO₂。

细胞形态：巨噬细胞样，贴壁生长

倍增时间：24~48ｈ

传代比例：1：3～1：6

OriCell® 细胞货号：M3-0101

OriCell^® 完全培养基货号：CMM3-0101（500mL）

OriCell^® 即用型培养基货号：DMM3-0101（200mL）

细胞背景

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系（RAW264.7）是从Abelson小鼠白血病病毒诱发的BALB/c雄性小鼠的肿瘤组织中分离出来的，该细胞易于培养和传代，对RNA干扰敏感、DNA转染效率高，常用作转染宿主细胞和复制小鼠诺如病毒。细胞表面sIg-、Ia-、Thy-1.2抗原阴性。

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系（RAW264.7）可用于氧化应激、炎症和抗菌活性等研究。在免疫学研究中，巨噬细胞的免疫应答机制，如细胞因子的产生与功能，在炎症相关研究中，能模拟体内炎症反应，筛选抗炎药物等。

一、RAW264.7细胞到底是什么形态的呢？

在常规培养状态下，RAW264.7细胞在未受诱导分化时主要表现为两种形态：贴壁不紧密的纺锤状细胞以及圆形/立方形细胞。随着培养体系中细胞密度的增加，部分贴壁细胞会出现形态学改变，表现为胞体回缩变圆或形成细胞聚集体，其中部分细胞会脱离培养基底进入悬浮状态。

Tips：这些悬浮细胞仍保持生物学活性，在进行传代操作时应当予以保留，可通过250×g 离心4 min收集这些细胞，将获得的细胞沉淀重新悬浮后即可继续用于后续培养。

  100X        

200X

RAW264.7镜下良好形态

二、RAW264.7细胞分化后的细胞形态是怎样的呢？

• 由贴壁不紧密的纺锤状细胞以及圆形/立方形细胞形态，转变为大而扁平的不规则多边形或多突触状且贴壁能力显著增强；
• 细胞边缘可见明显的丝状伪足；
• 胞质铺展面积增大，细胞出现扁平化；

                                   40X                                         

100X

RAW264.7镜下极化后形态

三、RAW264.7如何处理才能减少分化呢？（吹打法）

• 传代时使用吸管或移液管吸弃部分细胞培养上清，留少许培养上清在细胞培养瓶或皿中，方便吹打即可。（如6 cm培养皿只留2~3 mL上清）。

注意：若镜下观察有大量悬浮细胞存在，需将上清全部收集和吹打后的细胞一起离心，避免损失。

• 使用1 mL一次性枪头或移液管吸取培养上清，直接吹打培养容器底面数次。

注意：吹打动作不可剧烈，避免产生大量气泡，可能损伤细胞，已分化且吹不下来的细胞果断丢弃。

• 将细胞悬液转移至15 mL离心管中。
• 用PBS（6 cm培养皿加入约3 mL，10 cm培养皿加入约6 mL）洗涤培养容器1次，收集残留细胞。
• 收集的所有细胞悬液以250×g离心4 min。
• 离心后去除上清。
• 15 mL离心管中加入2 mL完全培养基，轻柔吹打细胞沉淀，充分吹散、混匀。
• 将细胞按(4~6)×10⁴个活细胞/cm²接种至适宜的培养容器内。
• 摇匀细胞，放入37℃、5% CO₂、饱和湿度的CO₂培养箱中。
• 传代次日，观察细胞状态。若发现较多漂浮且状态不佳细胞，应予以换液。

每3天更换一次新鲜的培养基，待细胞汇合度至85%以上，即需传代或冻存。

Tips：

建议使用培养皿进行该细胞培养，原因：

• 相较培养瓶来说，培养皿因物理空间和表面张力差异表现出更易吹打的特点；
• 培养皿的开放结构允许枪头低角度吹打，减少流体剪切力对贴壁较弱细胞的损伤。