文献封面截图^[1]

HepG2、Caco-2、293T和原代细胞在含有10%优级胎牛血清（货号FBSSR-01021，赛业OriCell^®）和1%青霉素-链霉素的培养基中培养；肠道特异性敲除小鼠、小鼠体成分分析、葡萄糖耐量试验（GTT）、胰岛素敏感性试验（ITT）等；研究运用了组织学分析、转录组测序、fEVs体内追踪等方法。

1. 通过单细胞转录组测序和普通转录组测序，筛选出影响肠道脂质吸收的基因HLF。

2. 构建肠道特异性敲除HLF小鼠验证表型。

3. 通过转录组测序和分子实验筛选下游靶基因PPARα。

4. 建立PPARα的抑制剂GW6471小鼠模型验证机制。

5. 分离肠道微生物来源的细胞外囊泡，细胞和活体水平上验证机制。

 

 

图1. 肠道特异性敲除HLF对脂代谢的影响^[1]

 

研究团队选择健康的食蟹猴以及自发性代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）食蟹猴，通过对食蟹猴肠道组织进行单细胞转录组测序（scRNA-seq）和普通转录组测序（RNA-seq），并结合细胞实验（使用赛业OriCell^®优级胎牛血清培养）筛选和验证出HLF影响肠道脂质吸收（图2）。

图2. 肝白血病因子（HLF）是调节肠道脂质吸收的新靶点^[1]

HLF缺乏改善MAFLD

培育肠道特异性敲除Hlf基因杂合和纯合小鼠，探究肠道HLF在肝脏脂质代谢紊乱中的作用。结果表明，Hlf缺乏可能通过改善肠道屏障功能抑制外源性脂质的消化和吸收，进而改善MAFLD（图3）。

缺乏肝白血病因子（HLF）改善代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）^[1]

为了进一步阐明HLF的作用机制，通过转录组测序和细胞实验（使用赛业OriCell^®优级胎牛血清培养）筛选和验证，HLF通过调控PPARα影响肠道脂质代谢（图4）。

图4. 肝白血病因子（HLF）调节过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）表达^[1]

为了探究PPARα是否参与HLF对MAFLD的调控，使用其抑制剂GW6471在活体水平进行研究（图5）。结果表明，HLF可能通过抑制PPARα来改善氧化应激和肠道菌群稳态进而缓解MAFLD。

图5. 抑制过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）缓解代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）^[1]

由于细胞外囊泡（EVs）在肠肝循环中起着关键作用，研究团队用GW6471处理小鼠，并从其肠道内容物中分离出肠道来源的细胞外囊泡（fEVs）。在细胞（使用赛业OriCell^®优级胎牛血清培养）和活体水平上进行实验验证（图6）。结果表明，来自GW6471处理小鼠的fEVs通过改善肠道屏障功能和抑制铁死亡，缓解MAFLD。

GW6471处理小鼠的肠道微生物来源的细胞外囊泡（fEVs）改善肠道通透性并抑制铁死亡^[1]

通过脂质组学分析，研究了fEVs对肝脏脂质代谢的影响。实验表明，牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）可降低细胞内氧化应激，并抑制铁死亡，证明其在fEVs介导的肝脏脂质代谢调控中发挥重要作用（图7）。

肠道微生物来源的细胞外囊泡（fEVs）中的脂质变化影响肝脏脂肪变性^[1]

原文检索：

[1] Xingzhen Yang, Jiale Wang, Xinyu Qi, Menglong Hou, Mengkuan Liu, Yixing Li, Lei Zhou, et al. 2025. HLF and PPARα axis regulates metabolic-associated fatty liver disease through extracellular vesicles derived from the intestinal microbiota. iMeta 4: e70022. https://doi.org/10.1002/imt2.70022